Nucleic Acid ထုတ်ယူခြင်းကိရိယာ (A02)
ထောက်လှမ်းခြင်းနိယာမ
lysis buffer ဖြင့် ဆဲလ်များကို ခွဲခြင်းဖြင့် မျိုးဗီဇ DNA ကို ထုတ်လွှတ်ပြီးနောက်၊ သံလိုက်ပုတီးသည် နမူနာရှိ မျိုးဗီဇ DNA နှင့် ရွေးချယ် ချည်နှောင်နိုင်သည်။သံလိုက်ပုတီးမှစုပ်ယူထားသော အညစ်အကြေးအနည်းငယ်ကို ဆေးကြောသည့်ကြားခံဖြင့် ဖယ်ရှားနိုင်သည်။TE တွင်၊ သံလိုက်ပုတီးစေ့သည် အရည်အသွေးမြင့် genome DNA ကိုရရှိပြီး boundgenome DNA ကို ထုတ်လွှတ်နိုင်သည်။ဤနည်းလမ်းသည် ရိုးရှင်းပြီး လျင်မြန်ပြီး ထုတ်ယူထားသော DNA အရည်အသွေး မြင့်မားသောကြောင့် DNA မက်သွိုင်းရှင်းကို ရှာဖွေတွေ့ရှိရန် လိုအပ်ချက်ကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။တစ်ချိန်တည်းတွင်၊ သံလိုက်ပုတီးစေ့ကိုအခြေခံ၍ ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာသည် အလိုအလျောက် နျူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်းနှင့် သဟဇာတဖြစ်ပြီး မြင့်မားသော နူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်းလုပ်ငန်းများကို ဖြည့်ဆည်းပေးနိုင်သည်။
ဓာတ်ပစ္စည်းများ၏ အဓိက အစိတ်အပိုင်းများ
အစိတ်အပိုင်းများကို ဇယား 1 တွင် ပြထားသည်။
ဇယား 1 ဓါတ်ပစ္စည်းပါဝင်မှုများနှင့် Loading
အစိတ်အပိုင်းအမည် | အဓိကအစိတ်အပိုင်းများ | အရွယ်အစား (၄၈)၊ | အရွယ်အစား (၂၀၀)၊ |
1. Digestion Buffer A | Tris၊ SDS | 15.8 mL/ပုလင်း | 66ml/ပုလင်း |
2. Lysis Buffer L | Guanidinium Isothiocyanate၊ Tris | 15.8 mL/ပုလင်း | 66ml/ပုလင်း |
3. Buffer A ကို ဆေးကြောပါ။ | NaCl၊ Tris | 11 mL/ပုလင်း | 44 mL/ပုလင်း |
4. Buffer B ကို ဆေးကြောပါ။ | NaCl၊ Tris | 13 mL/ပုလင်း | 26.5 ml/ပုလင်း *2 |
5. TE | Tris၊ EDTA | 12 mL/ပုလင်း | 44 mL/ပုလင်း |
6. Protease K ဖြေရှင်းချက် | ပရိုတင်း K | 1.1 မီလီလီတာ / အပိုင်း | 4.4 မီလီလီတာ/တစ်ပိုင်း |
7. Magnetic bead suspension ၂ | သံလိုက်ပုတီးများ | 0.5 မီလီလီတာ / အပိုင်း | 2.2 မီလီလီတာ/တစ်တုံး |
8. nucleic acid reagents ထုတ်ယူရန် ညွှန်ကြားချက်များ | / | 1 မိတ္တူ | 1 မိတ္တူ |
nucleic acid ထုတ်ယူရာတွင် လိုအပ်သော အစိတ်အပိုင်းများ ဖြစ်သော်လည်း ပစ္စည်းအစုံတွင် မပါဝင်ပါ။
1. ဓာတ်ပြုခြင်း- မဟိုက်ဒရော့စသော အီသနော၊ အိုင်ဆိုပရောပနော၊ နှင့် PBS;
2. စားသုံးနိုင်သောပစ္စည်းများ- 50mL centrifuge tube နှင့် 1.5mL EP tube;
3. စက်ပစ္စည်း- ရေချိုးခန်း၊ ပိုက်ပိုက်များ၊ သံလိုက်စင်၊ centrifuge၊ 96 ရေတွင်းပန်းကန် (အလိုအလျောက်)၊ အလိုအလျောက် နျူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာ (အလိုအလျောက်)။
အခြေခံအချက်အလက်
နမူနာလိုအပ်ချက်များ-
1. သားအိမ်ခေါင်းအတွင်းပိုင်း ဖယ်ထုတ်ထားသောဆဲလ်နမူနာ (ပုံသေမဟုတ်) စုဆောင်းပြီးနောက် 7-ရက်ပတ်၀န်းကျင်အပူချိန်သိုလှောင်မှုအောက်တွင် ထောက်လှမ်းမှုကို ပြီးမြောက်စေရမည်။
2. သားအိမ်ခေါင်းအတွင်းပိုင်း ဆဲလ်နမူနာ (ပုံသေ) စုဆောင်းပြီးနောက် ရက်ပေါင်း 30 ပတ်၀န်းကျင် အပူချိန် သိုလှောင်မှုအောက်တွင် ထောက်လှမ်းမှုကို ပြီးမြောက်စေရမည်။
3. ဆီးနမူနာကို စုဆောင်းပြီးနောက် ပတ်ဝန်းကျင် အပူချိန်၏ ရက်ပေါင်း 30 သိုလှောင်မှုအောက်တွင် ထောက်လှမ်းခြင်းကို ပြီးမြောက်စေရမည်။မွေးမြူထားသောဆဲလ်နမူနာများကို စုဆောင်းပြီးနောက် ထောက်လှမ်းမှုကို အချိန်မီ ပြီးမြောက်စေရမည်။
ကားပါကင်သတ်မှတ်ချက်-200 PCs/box, 48pcs/box.
သိုလှောင်မှုအခြေအနေများ-2-30 ℃
တရားဝင်သက်တမ်း-၁၂ လ
အသုံးပြုနိုင်သော စက်-Tianlong NP968-C နျူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်းတူရိယာ၊ Tiangen TGuide S96 နျူကလိယအက်ဆစ်ထုတ်ယူခြင်းတူရိယာ၊ GENE DIAN EB-1000 နူကလိစ်အက်ဆစ်ထုတ်ယူသည့်ကိရိယာ။
ဆေးဘက်ဆိုင်ရာ ကိရိယာ မှတ်တမ်း လက်မှတ် အမှတ်/ထုတ်ကုန် နည်းပညာ လိုအပ်ချက် နံပါတ်-HJXB အမှတ် 20210100 ။
ညွှန်ကြားချက်များ၏ အတည်ပြုချက်နှင့် ပြန်လည်ပြင်ဆင်သည့်ရက်စွဲ-ခွင့်ပြုချက်ရက်စွဲ- နိုဝင်ဘာ ၁၈၊ ၂၀၂၁
ကြှနျုပျတို့အကွောငျး
ထိပ်တန်း epigenetic ကျွမ်းကျင်သူများက 2018 ခုနှစ်တွင် တည်ထောင်ခဲ့သော အဆင့်မြင့်နည်းပညာလုပ်ငန်းတစ်ခုအနေဖြင့် Epiprobe သည် ကင်ဆာ DNA methylation နှင့် တိကျသော theranostics လုပ်ငန်း၏ မော်လီကျူးရောဂါရှာဖွေခြင်းအပေါ် အာရုံစိုက်သည်။လေးနက်သောနည်းပညာအခြေခံဖြင့်၊ ကျွန်ုပ်တို့သည် ကင်ဆာရောဂါကို ပျောက်စေမည့် ထုတ်ကုန်အသစ်များ၏ ခေတ်ကို ဦးတည်သွားစေရန် ရည်ရွယ်ပါသည်။
Epiprobe core အဖွဲ့၏ ရေရှည်သုတေသန၊ ဖွံ့ဖြိုးတိုးတက်မှုနှင့် ကင်ဆာများ၏ ထူးခြားသော DNA methylation ပစ်မှတ်များနှင့် ပေါင်းစပ်ကာ နောက်ဆုံးပေါ် ဆန်းသစ်တီထွင်မှုများဖြင့် DNA methylation နယ်ပယ်တွင် အသွင်ပြောင်းခြင်းအပေါ် အခြေခံ၍ ကျွန်ုပ်တို့သည် ကြီးမားသောဒေတာနှင့် ဉာဏ်ရည်တုနည်းပညာကို ပေါင်းစပ်ထားသော ထူးခြားသော Multivariate algorithm တစ်ခုကို အသုံးပြုပါသည်။ သီးသန့်မူပိုင်ခွင့်ကာကွယ်ထားသော အရည်အသားစဥ်နည်းပညာကို လွတ်လပ်စွာဖန်တီးပါ။နမူနာရှိ အခမဲ့ DNA အပိုင်းအစများ၏ တိကျသောဆိုဒ်များ၏ methylation အဆင့်ကို ခွဲခြမ်းစိတ်ဖြာခြင်းဖြင့်၊ သမားရိုးကျ စစ်ဆေးမှုနည်းလမ်းများ၏ ချို့ယွင်းချက်များနှင့် ခွဲစိတ်မှုနှင့် ထိုးဖောက်နမူနာများ၏ ကန့်သတ်ချက်များကို ရှောင်ရှားနိုင်သည်၊ ၎င်းသည် အစောပိုင်းကင်ဆာများကို တိကျစွာသိရှိနိုင်ရုံသာမက အချိန်နှင့်တပြေးညီ စောင့်ကြည့်မှုကိုလည်း လုပ်ဆောင်နိုင်မည်ဖြစ်သည်။ ကင်ဆာဖြစ်ပွားမှုနှင့် ဖွံ့ဖြိုးမှုဒိုင်းနမစ်များ။